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ActSep®CD3/CD28激活磁珠

在国际顶级学术期刊发表高分论文(影响因子44.54),该研究使用同立海源CD3/CD28单抗偶联磁珠

1ml/¥3280
咨询电话 400-010-5556

产品货号:GMP-TL601

ActSep® CD3/CD28激活磁珠(ActSep®CD3/CD28 Activation Magnetic Beads),GMP级

 

产品货号:GMP-TL601


 

 产品描述(Description)

 

 ActSep®CD3/CD28激活磁珠提供了一种不需要抗原呈递细胞就能激活和扩增T细胞的简单方法。通过在磁珠上偶联抗CD3和抗CD28单克隆抗体,提供T细胞激活和扩增需要的初级和协同刺激信号,实现T细胞的激活和扩增。

 

 原理图

 

 

 产品特点(Advantages)

 

1、4.5um磁珠与细胞大小匹配

2、T细胞活化无需滋养层细胞

3、产品表现稳定,对细胞损伤小

4、9-14天可扩增100倍以上

5、ISO13485医疗器械质量管理体系认证

 

 

 


浓度(Concentration)

 

2×108beads/ml

 

 

 

反应种属(Reaction Species)

 

 

 

 

内毒素(Endotoxin)


<2EU/mL




 适用范围

 

T 淋巴细胞

 

 

 

保存温度(Storage Temperature)

 

2~8℃

 

 

 

使用方法(Usage method)


ActSep®CD3/CD28激活磁珠的清洗:

1.1 重悬磁珠(涡旋超过30s,或者颠倒混匀5min);

1.2 按实际用量需求,将确定体积的磁珠转移至离心管中;

1.3 加入等体积的含1% HSA的PBS缓冲液,若磁珠体积小于1 mL,则加 l mL含1% HSA的PBS缓冲液,进行重悬润洗,吹打或涡旋;

1.4将上述装有重悬磁珠的离心管放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,弃去上清,注意不要吸取到磁珠。

1.5于上述离心管中加入与1.2等体积的含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基重悬磁珠备用。


磁珠激活和扩增 T细胞

2.1 用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至1~1.5×106cells/mL,将调整好密度的细胞置于细胞培养容器中。

2.2按照磁珠和T细胞数量比例(推荐比例范围为1:1 ~ 3:1。在实际应用中,客户可根据实际情况摸索调整),将上述1.5重悬的磁珠按比例加入铺好细胞的培养容器中。

2.3将上述培养容器置于37℃,5% CO2培养箱中培养。

2.4根据实验需求,可在培养阶段对活化的T细胞进行进一步分析(取样后,去除磁珠并对细胞进行流式检测)。

2.5逐日观察细胞状态,建议每周至少两次对细胞进行取样计数,并定期补液。

2.6当细胞密度超过2.5×106cells/mL或培养基变黄时,调整细胞密度至0.5~1×106cells/mL。将细胞培养至适宜时长后(一般12~14天)即可收获细胞。

2.7若培养时间需延长,可考虑通过对细胞再刺激培养,具体如下:

2.7.1重新刺激前,将细胞转至干净的无菌离心管中,用磁力架(磁珠专用)去除使用过的磁珠。

2.7.2将含有细胞的悬液转至新的离心管中,用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至0.5~1×106cells/mL。

2.7.3重复磁珠清洗、磁珠激活和扩增T细胞的步骤。细胞培养至适宜天数后,可去除磁珠收获细胞。

注意事项:

1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液,以便充分分散磁珠和细胞。

2.培养过程中,可以每2~3天进行细胞计数,细胞计数前均需去磁,去磁过程:将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中,将其放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,取上清至新的离心管。

3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。


磁珠使用说明

 

 

 

 实验数据(Experimental Data)

磁珠实验数据

磁珠实验数据

 

 


 

♦ 参考文献

 

Donor-Derived CD7 Chimeric Antigen Receptor T Cells for T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: First-in-Human, Phase I Trial

影响因子:44.54

 



  注意事项

 

1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液,以便充分分散磁珠和细胞。

2.培养过程中,可以每2~3天进行细胞计数,细胞计数前均需去磁,去磁过程:将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中,将其放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,取上清至新的离心管。

3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。




   注意:For research and manufacturing use.

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