人
<2EU/mL
棕色液体
2~8℃
6 个月
实验步骤
1.1 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数,取1×10⁷个细胞至1.5mL EP管中,1500rpm,离心5min。
1.2 弃上清,若进行去除分选,取80μL MACS Running buffer (130-091-221) 溶液重悬细胞,加入20μL CD3分选磁珠;若进行富集分选,取90μL MACS Running buffer溶液重悬细胞,加入10μL CD3分选磁珠,混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
1.3 取LS分选柱 (130-042-401) 放入MACS分选器 (130-042-303) 上,用1mL MACS Runningbuffer润洗两次。
1.4 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出,加入1mL MACS溶液,1500rpm,5min离心,弃上清。
1.5 加入1mL MACS Running buffer重悬,将样品加入分选柱中,待其自然流出后,分两次加入Running buffer,每次加1mL,15mL离心管收集流出液。
1.6 待MACS Running buffer全部流出后,将分选柱从MACS分选器上取下,放到另一新的15mL离心管中,向分选柱中加入3mL MACS Running buffer,用LS分选柱配套活塞将液体直接打出。
1.7 将装有收集液的15mL离心管放入水平离心机,1500rpm,离心5min。
1.8 离心完成后倒掉上清,取1mL 1×DPBS溶液重悬细胞,计数并进行流式检测。
磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀,以提高分选效率。
纳米级 CD3分选磁珠可用于分选人CD3⁺T细胞,通过在磁珠上偶联抗人 CD3单克隆抗体,实现CD3⁺T细胞的分选。该磁珠有多种用途,既能够从 PBMC 中分离去除CD3⁺细胞,也能够从 PBMC中富集CD3⁺细胞,起到去除 T 细胞或者纯化T细胞的作用和功能。适用于生产细胞治疗产品。