人
<2EU/mL
棕色液体
1. 将含有10%左右U266的PBMC混合细胞样本重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数,取1×10⁷个细胞至1.5mL Ep管中,1500rpm,离心5min。
2. 弃上清,取90μL MaxSortin™ 细胞分选缓冲液溶液重悬,加入10μL的 MaxSortinT™ CD138分选磁珠,混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
3. 取MaxSortin™ L型分离柱放入MACS分选器上,用1mL MaxSortin™ 细胞分选缓冲液润洗两次。
4. 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出,加入1mL MaxSortin™ 细胞分选缓冲液,1500rpm,5min离心,弃上清。
5. 加入1mL MaxSortin™ 细胞分选缓冲液重悬,将样品加入MaxSortin™ L型分离柱中,待其自然流出后,分两次加入MaxSortin™ 细胞分选缓冲液,每次加3mL,清洗挂柱细胞。
6. 待MaxSortin™ 细胞分选缓冲液全部流出后,将MaxSortin™ L型分离柱从MACS分选器上取下,放到15mL离心管中(做好标记)。向MaxSortin™ L型分离柱中加入3mL MaxSortin™ 细胞分选缓冲液,用活塞将液体直接打出,收集到的细胞即为CD138+细胞。
7. 计数并进行流式检测。
1. 磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀,以提高分选效率。
2. 当CD138+细胞占比3%以下时,推荐向其中加入5μL磁珠。当CD138+细胞占比3%以上时,推荐向其中加入10μL磁珠。
MaxSortinTM CD138分选磁珠可用于分选CD138+细胞。通过在磁珠上偶联抗人CD138单克隆抗体,并与细胞孵育,然后进行磁性分离,实现CD138+细胞的分选。