人
<2EU/mL
黄色至棕色液体
1. 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数,取1×10⁷个细胞至1.5mL Ep管中,1500rpm,离心5min。
2. 弃上清,取80μL MaxSortin®细胞分选缓冲液重悬,加入20μL MaxSortin®CD14分选磁珠,混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
3. 取MaxSortin® L型分离柱放入MACS分选器上,用1mL MaxSortin®细胞分选缓冲液润洗两次。
4. 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出,加入1mL MaxSortin®细胞分选缓冲液,1500rpm,5min离心,弃上清。
5. 加入1mL MaxSortin®细胞分选缓冲液重悬,将样品加入分离柱中,待其自然流出后,分两次加入 MaxSortin®细胞分选缓冲液,每次加1mL,15mL管收集流出液。
6. 待MaxSortin®细胞分选缓冲液全部流出后,将分离柱从MACS分选器上取下,放到另一新的15mL离心管中,向分离柱中加入3mL MaxSortin®细胞分选缓冲液,用分离柱配套活塞将液体直接打出。
7. 将装有收集液的15mL离心管放入水平离心机,1500rpm,离心5min。
8. 离心完成后倒掉上清,取1mL 1×DPBS溶液重悬细胞,计数并进行流式检测。
1. 磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀,以提高分选效率。
2. 该试剂盒配套缓冲液和分离柱可供起始实验使用,如涉及更多次实验操作,请另行购买MaxSortin®细胞分选缓冲液(货号:MS-BF100)及MaxSortin®L型分离柱(货号:MS-CL01)。
MaxSortin®CD14分选试剂盒可用于富集或者去除分选人PBMC中的单核细胞和巨噬细胞,通过纳米级CD14分选磁珠与细胞孵育,实现CD14+细胞的分选。利用MaxSortin®CD14分选磁珠与PBMC孵育并进行磁性分离,使CD14+细胞分离并富集,起到去除或纯化CD14+细胞的作用和功能。