细胞分选，也被称为细胞的分离纯化，即对样本中的目标细胞进行分离和富集，在医学诊断、治疗和生物医学基础研究中均具有重要作用。细胞分选方法总体上可分为三种：基于细胞培养特性的分选技术、基于细胞物理性能的分选技术和基于生化亲和力的细胞分选技术。磁珠分离纯化细胞的分选方法则属于基于生化亲和力的细胞分选技术。该方法操作简单，可在较短时间内获得高纯度的靶细胞，且无需大型仪器，因此成为当前细胞分选中较为常用的方法之一。
磁性细胞分选是用结合有抗体的免疫磁珠与样品细胞进行孵育，表达有相应抗原的细胞就会特异地结合在包被有抗体的免疫磁性微粒上。
免疫磁性细胞分选原理示意图
当混合体系缓慢地经过磁场时，带有磁珠的细胞就会滞留在磁珠上，而非目的细胞由于未结合磁珠仍存在与混合细胞悬液中，从而达到分离、纯化细胞的目的。MACS法是一种相对高效、简便的细胞分选方法，所需设备简单，只需一块专用磁铁即可进行分选，操作较为简单，对操作人员的技术要求也不高，一般实验室都可进行磁性分选。
磁性分选只是让细胞处于一个低磁场中，基本可以忽略对细胞结构和功能的影响。分离得到的细胞具有较高的复苏率及细胞活性，对于下游应用影响较小，在保持细胞活性方面优于流式分选。磁性分选因其高灵敏度、高纯度、易操作、对目的细胞刺激较小等特性成为了细胞分选的首选方法，具有潜在的广泛应用前景。
根据分选方法的不同可以将免疫磁性细胞分选划分为直接分选法和间接分选法。
●直接分选法
直接分选法是指将抗体或亲和配体直接包被在磁性颗粒上，形成免疫磁性复合微粒。将其与多细胞悬液混合孵育之后，目的细胞会特异性地结合在免疫磁珠上。在外加磁场作用下，带有磁珠的靶细胞会滞留在磁场中，而非目的细胞则会被去除。
●间接分选法
间接分选法分选细胞是引入了二抗，将目的细胞首先与对应的一抗孵育、激活细胞，之后清洗出未结合的一抗，然后加入预先包被有二抗的磁性颗粒与活化后的细胞孵育。一抗与二抗之间的相互作用会导致磁粒结合在目的细胞上，同样在磁场作用下滞留目的细胞，从而达到分选的目的。
目前已有分选磁珠应用于针对细胞亚群的分选，最常见的有从人的外周血中分离细胞亚群，如B淋巴细胞、T淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、自然杀伤细胞等。
随着肿瘤免疫理论和生物技术的发展，过继性免疫治疗在靶向性、杀伤性和持久性方面均取得了很大的进步。以T细胞受体和嵌合抗原受体修饰了以T细胞为代表的治疗新技术在体外治疗和临床试验中都取得了令人鼓舞的抗肿瘤效果[1]。
对标近些年国内外的研究，我们可以发现CD3和CD28的联合使用具有协同免疫性。其中将CD3单抗与CD28单抗联用不仅可以促进一些免疫细胞的增殖，还能提高免疫细胞对肿瘤的杀伤能力，兼具T淋巴细胞的抗瘤活性的同时，还保留了NK细胞的非MHC限制性的对肿瘤细胞的杀伤作用。免疫效应细胞是过继免疫治疗的主体，长期以来人们不断探讨过继转移T细胞的采集方法、活化方式以及扩增效率。根据T细胞活化双信号学说，相关科研者采用CD3/CD28免疫磁珠模拟了人工抗原递呈细胞模式。通过CD3/TCR复合体和共刺激分子双信号通路激活T细胞[2]。CD3/CD28免疫磁珠的大小为4.5μm左右，与T细胞大小一致，可以有效地结合T细胞表面的相关受体。
抗CD3抗体免疫磁珠由高性能的特异性IgG1单克隆抗体与磁珠共价偶联，后期经过封闭处理，可以直接用于人CD3+细胞的捕获，具有较高的CD3细胞结合量以及非特异结合低的特点。CD28抗原是I型跨膜蛋白，在大多数CD4+T细胞、许多CD8+T细胞和恶性浆细胞（骨髓瘤细胞）上高表达。而在CD28磁珠实验中，CD28细胞用CD28-PE和Anti-PE磁珠间接雌性标记，通过阳选或阴选实现CD28阳性细胞的分离或去除。
此外，有相关研究表明，CD3/CD28免疫磁珠激活后，CD3+T细胞体外扩增殖时长可达7-14天，如果仍需继续激活则需要新一轮再次激活。这证实了CD3/CD28免疫磁珠可在体外实现CD3+T细胞的有效激活与扩增，为肿瘤过继免疫治疗效果的发挥提供了保障！
同立海源针对T细胞分选及激活培养需求特征，近期新上市产品ActSepTM CD3/CD28 分选激活磁珠（Cat. No. GMP-TL603）可用于分选人CD3+T细胞，不需要抗原呈递细胞或抗原就能激活和扩增T细胞，同时实现T细胞的分选、激活和扩增。该产品为国内首创，省时高效，应用性能不逊色进口主流磁珠产品，同时具备更明显的价格优势，保证货期，供应稳定可控。
产品优势
产品性能
▶ 高分选效率
Fig1：不同比例的细胞/磁珠，CD3+ T细胞的分选效率
▶ 有效激活T细胞
Fig2：磁珠刺激不同时间，T细胞激活状态
▶ 高效扩增T细胞
Fig3：不同比例的细胞/磁珠，T细胞的扩增效率
Fig4：培养体系中不去除磁珠和Day5时去除磁珠，均能有效扩增T细胞
▶ T细胞亚群变化
Fig5：培养体系中不去除磁珠和Day5时去除磁珠，CD4和CD8 T细胞比例变化
参考文献：
[1] Riches JC,Gribben JC,Advances in ehimeric antigen receptor immunotherapy for ehronic lymphocytic leukemia[J].Discov Med,2013,16(90):295-302.
[2] Fontana MF,Vance RE.Two signal models in innate inmunity[J].Immunol Rev,2011,243(1):26-39.
北京同立海源生物科技有限公司，专注细胞和基因治疗（CGT）上游GMP级原料试剂研发及生产，为CGT用户提供产品与服务的整体解决方案。产品涉及细胞分选磁珠试剂、真核/原核重组蛋白、无血清培养基、细胞培养试剂盒等。
公司建有3200㎡的研发实验室及GMP级洁净车间，包括细胞分选磁珠开发平台、真核与原核蛋白表达工程平台、无血清培养基开发平台，通过ISO13485和ISO9001双质量体系认证，部分产品已获美国FDA DMF备案。
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